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[荧光素酶影响因素及注意事项] 荧光素酶报告基因检测影响因素及注意事项
1. 报告基因检测受多种因素影响(载体状态、细胞状态、转染量、转染效率、裂解效率、加样精度、检测过程等),因此同批次样品检测值也可能出现浮动。所以实验一般需要做3个或3个以上复孔,并且引入另一个报告基因作为内参。2. 细胞培养时间不宜过长,12-36h内*好;长时间培养后,细胞难裂解3. 双荧光素酶报告基因的载体选择: a) 萤火虫荧光素酶建议选取pGL-3或pGL-4的载体或自己构建相应的载体;...[荧光素酶报告基因常见问题] 荧光素酶检测系统及荧光素酶报告基因载体
一些常见问题: 什么是荧光素酶检测系统?如何使用荧光素酶报告基因载体? 荧光素酶报告基因与其他分子相比有哪些优点? Promega 公司的荧光素酶检测系统与其他常用的荧光素酶检测系统相比如何? pGL3 荧光素酶报告基因载体与 pGL2 荧光素酶报告基因载体有何区别? 报告基因裂解液与细胞培养裂解试剂间有何区别? 5x报告基因裂解液的组分如何? 用冻融法制备的细胞裂解物能用于荧光素酶检测系统吗? ...[双荧光素酶报告基因常见问题] 双荧光素酶测试系统及海肾类对照报告基因载体
一些常见问题: 什么是双荧光素酶报告基因测试系统 (DLR) ? 有哪些海肾荧光素酶载体? 用双报告基因有何优点? 相比用CAT 或 β - 半乳糖苷酶对表达数据作归一化,双荧光素酶报告基因测试系统有何优点? 海肾荧光素酶与萤火虫荧光素酶相比的相对活性如何? 两个报告基因载体作共转染应用什么条件? 需用荧光测试仪对双荧光素酶报告基因测试系统的荧光素酶作测定吗? 作荧光素酶报告基因测试时,如何使用...[双荧光素酶报告基因检测] 双荧光素酶报告基因发光检测
双报告基因用于实验系统中作相关的或成比例的检测, 通常一个报告基因作为内对照, 使另一个报告基因的检测均一化。检测基因表达时双报告基因通常用来瞬时转染培养细胞,带有实验报告基因的载体共转染带有不同的报告基因作为对照的第二个载体。通常实验报告基因偶联到调控的启动子, 研究调控基因的结构和生理基础。报告基因表达活力的相对改变与偶联调控启动子转录活力的改变相关,偶联到组成型启动子的第二个报告基因,提供转...[萤火虫荧光素酶检测] 萤火虫荧光素酶报告基因发光检测
荧光素酶(Luciferase)是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称,其中*有代表性的是来自北美萤火虫(Photinus pyralis)体内的荧光素酶。萤火虫荧光素酶属于加氧酶(oxygenase),其发光反应需要O2和Mg2+参与;有辅酶A(CoA)存在时能提高反应效率,增加发光时间。萤火虫荧光素酶无需翻译后修饰,即可表现出荧光素酶活性。因此可将萤火虫荧光素酶的基因插入不同载体,作为报告基因,... *如果您在实验中遇到任何问题, 请与我们的技术人员沟通, 我们将提供帮助.
联系电话: 010-82888900转803 电子邮箱: helpyph-bio.com
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