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Steady-Glo ®荧光素酶检测试剂盒在Veritas微孔板发光检测仪上的应用

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简介:

Steady-Glo ®荧光素酶检测试剂盒在Veritas微孔板发光检测仪上的应用
Turner BioSystems 公司的VeritasTM微孔板发光检测仪与Steady-Glo荧光素酶试剂盒联合使用提供了一种方便、快速且灵敏的定量基因表达的方法。转录调控和荧光素酶报告基因耦联表达,被用在研究培养细胞的生物学领域。荧光素酶是理想的报告基因,因为哺乳动物细胞中不含有内源性荧光素酶,转录完成立刻就生成功能性的荧光素酶。
Steady-Glo™荧光素酶检测系统的荧光素酶检测具有较高的灵敏度,Steady-Glo 试剂的发光半衰期大约为5 小时,光信号能在加入试剂后5min 到数小时之间都能检测到。同时Steady-Glo 试剂应该与哺乳动物细胞培养基(RPMI 1640, MEMa, DMEM and Ham's F12)相匹配,并且不会受到酚红和有机溶剂的影响。
VeritasTM微孔板发光检测仪与Steady-Glo™荧光素酶试剂盒联合使用时,有非常高的灵敏度,低可以检测到1X10-18 mol 荧光素酶分子。荧光素酶的检测线性范围为1X10-18-1X10-11mol 或大于7个数量级(图 1)。实验由Steady-Glo 荧光素酶检测试剂盒(Promega 货号 # E2520)来完成,重组的萤火虫荧光素酶纯化,也用Promega 产品(Promega 货号 # E1701)。