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Quant-iT™ RiboGreen® RNA 定量检测试剂盒在Modulus II微孔板型多功能检测仪上的应用

已下载1839次 / 原平皓生物
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简介:

 Quant-iT™ RiboGreen® RNA定量检测试剂是一种超灵敏的核酸荧光染料.这种试剂可用于多种分子生物学实验中的RNA浓度快速检测,例如题外转录、northern杂交分析、RT-PCR、差异显示PCR、S1核酸分析、RNase保护分析以及用于文库的cDNA合成等。
通常我们使用260nm的光吸收来测定RNA浓度,但这种方法的灵敏度不高(4mg/ml RNA),而且检测结果易受核苷酸、蛋白和RNA溶液中的盐离子影响。使用RiboGreen这类荧光染料来检测RNA可以避免上述问题。
Turner Biosystems公司的ModulusTM微孔板型多功能检测仪与RiboGreen® RNA检测试剂盒连用,可以实现在微孔板中快速准确的定量RNA。当RiboGreen染料处于溶液形式时,几乎没有荧光特性,当RiboGreen染料与RNA结合时,才表现出荧光特性。当RiboGreen-RNA复合物大激发波长为500nm,大发射波长为525nm。
使用ModulusTM微孔板型多功能检测仪的Blue荧光模块可以检测到50pg的RNA。RiboGreen® RNA检测试剂检测灵敏度要比EB检测法高出200倍,比260nm检测法高出1000倍。
使用两种浓度的RiboGreen试剂联合,可以检测到超过4个数量级的RNA(2.5ng/mL-1µg/mL)。高浓度的RiboGreen试剂可以检测到10ng/ml至1µg/mL的RNA,通过降低RiboGreen试剂的浓度可以检测到更低浓度的RNA(1 ng/mL – 50 ng/mL)