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Dual-Luciferase双荧光素酶检测试剂盒在GloMax2020发光检测仪上的应用

已下载1355次 / 原平皓生物
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简介:

      GloMax 20/20发光检测仪和Dual-Luciferase 双荧光素酶报告基因检测试剂盒联合使用为基因表达的定量研究提供了一种方便、快捷、灵敏的方法。利用转录调控和荧光素酶报告基因耦联表达,常被用于研究培养细胞的多种生物学特性。荧光素酶是理想的报告基因,因为哺乳动物细胞中不含内源性荧光素酶,一旦转录完成立即生成功能性的荧光素酶。
     Dual-Luciferase 双荧光素酶报告基因检测系统中含有在同一细胞中同时表达的两种荧光素酶。通常,报告基因实验会受到各种实验条件的影响,共转染的“对照”报告基因可以作为内参,为试验提供基准。报告基因经过内参照的处理可以减小细胞活性和转染效率对实验的影响,因此双报告系统减少了外部干扰,使得实验数据更可信。
Dual-Luciferase 报告基因检测实验中使用的报告基因和对照基因的酶没有同源性,萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶对应不同的反应底物,且没有交叉干扰。
萤火虫荧光素酶底物和海肾荧光素酶底物是专为进行高灵敏度检测而设计的检测试剂。由于具有超强的光信号和超高的信噪比,本系统被广泛用在制药和生物技术产业中。Dual-Luciferase 报告基因试剂与常用的哺乳动物细胞培养基兼容,如RPMI 1640, MEM, DMEM, and Ham's F12。该试剂可以与试剂盒带有的或者Promega单独出售的被动裂解液)连用。
具有超高灵敏度和超宽线性范围的GloMax 20/20发光检测仪特别适合DLR 报告基因检测系统, GloMax 20/20发光检测仪软件中预装了DLR 的检测程序使得安装更为方便。内置自动加样器使得使用更为简单方便。
     GloMax 20/20发光检测仪使用荧光素酶检测试剂II (LAR II)低可以检测到1X10-21 mol 荧光素酶分子,所有检测均使用纯化的重组萤火虫荧光素酶和纯化的重组海肾荧光素酶.