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用于DNA定量检测的Hoecsht 33258荧光染料在Modulus单管型多功能检测仪上的应用

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简介:

用于DNA定量检测的Hoecsht 33258荧光染料在Modulus单管型多功能检测仪上的应用
在分子生物学的许多试验中,DNA定量都是一个很重要的步骤。用到DNA的常用技术有序列分析、cDNA合成和克隆、RNA转录、转染、核酸标记(比如,随机引物标记)等等,这些试验的好坏取决于所使用模板浓度,对所用DNA模板浓度错误估计往往是导致这些实验失败的直接原因。
核酸的浓度通常用紫外,在260nm波长处,测吸光值获得,检测中的灵敏性会受到很高的背景干扰。Hoechst 33258,一种二苯甲亚胺DNA结合物,在检测时会有比紫外激发更强的荧光产生,检测更灵敏。它在紫外区(350 nm)附近被激发,发射波在蓝光区(450 nm),检测dsDNA的灵敏度是10 ng/ml(见图 1)。