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用于dsDNA定量检测的PicoGreen®荧光染料在Modulus单管型多功能检测仪上的应用

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简介:

用于dsDNA定量检测的PicoGreen®荧光染料在Modulus单管型多功能检测仪上的应用
在分子生物学的试验过程中,PicoGreen® dsDNA定量试剂盒是荧光检测双链DNA并进行定量的一种产品,这种方法非常灵敏。常用于分子生物学技术中的:cDNA 文库的构建;用于亚克隆的 DNA 片段纯化及应用,比如进行DNA定量、产物扩增1,2和引物的进一步检测3,4。
应用PicoGreen® dsDNA定量试剂盒能对至少100μl样品的dsDNA直接定量。Modulus多功能检测仪的检测灵敏度为100μl样品中45 pg的DNA。PicoGreen®检测线性范围4个数量级(图 1)。即使在核酸制备过程中引入了盐、尿素、乙醇、氯仿、去污剂、蛋白或琼脂等常见的几种污染物,这种检测结果的线性仍能获得。实验检测中的RNA和单链DNA产生的荧光量*小,当用PicoGreen®dsDNA定量试剂盒和Modulus™多功能检测仪进行实验时发现:相同克分子数的单链DNA和RNA对定量结果几乎没有什么影响。