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Steady-Glo荧光素酶检测试剂盒在TD2020n发光检测仪上的应用

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简介:

Steady-Glo荧光素酶检测试剂盒在TD2020n发光检测仪上的应用
Turner BioSystems 的20/20n发光检测仪与Steady-Glo®检测试剂盒连用为基因表达的定量检测提供了一种便捷、快速、灵敏的方法。利用转录调控和荧光素酶报告基因耦联表达,常被用于研究培养细胞的多种生物学特性。荧光素酶是理想的报告基因, 因为哺乳动物细胞中不含有内源荧光素酶, 且一旦转录完成立即生成功能性的荧光素酶.
Steady-Glo®荧光素酶检测系统是专为大限度的提高检测试剂的灵敏度而设计,该系统提供一种半衰期约为5小时的荧光信号。信号可在加入检测试剂后5分钟到几个小时之内进行检测。该试剂被广泛应用于制药和生物技术行业。而且它与哺乳动物细胞培养中常用的培养基如RPMI 1640, MEM, DMEM, and Ham's F12等兼容,对酚红和有机溶剂具有耐受性。
高度灵敏的20/20n发光检测仪与高效的Steady-Glo®的试剂连用可检测到*低水平的荧光素酶活性。20/20n低可以检测到1X10-19 mol荧光素酶分子. 检测线性范围从1X10-19 to 1X10-11 mole荧光素酶,线性范围为 8个数量级( 图1) .所有检测均使用Steady-Glo®荧光素酶检测试剂盒(Promega 货号E2520)和纯化的重组萤火虫荧光素酶(Promega 货号 E1701)