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基于ATP的细胞增殖检测

阅 9588次 / 原平皓生物
关键词: 发光检测, Luciferase, 萤火虫荧光素酶, ATP, 细胞增殖检测

简介：

        细胞的增殖是细胞活性的主要表现形式。目前主要有两种用于检测细胞增殖能力的方法。一种是直接的方法，通过直接测定进行分裂的细胞数来评价细胞的增殖能力，例如：BrdU检测法。另一种是间接的方法，即细胞活力（cell viability）检测方法，通过检测样品中健康细胞的数目来评价细胞的增殖能力，例如：MTT和ATP检测。MTT法通过检测细胞的氧化还原活性来检测细胞增殖能力，这种方法简单、经济，但灵敏度不高，误差较大。
        ATP是细胞的能量直接来，因此通过检测细胞中ATP的含量可以直接反应细胞的增殖、毒性状态。

原理：

检测方法：

以CellTiter-Glo检测试剂盒为例

1. 试剂准备
检测液配制：将CellTiter-Glo底物与buffer混合，使用前平衡到室温

2. 样品准备
检测前将细胞培养板平衡到室温
在细胞培养物中加入等体积的CellTiter-Glo检测液，轻混30s，然后孵育10min

3. 检测结果
孵育后，取反应液加入发光检测仪检测发光值

参考文献：

  1. Riss, T., Moravec, R. and Niles, A. (2005) Selecting cell-based assays for drug discovery screening. Cell Notes 13, 16–21.
  2. Farfan, A. et al. (2004) Multiplexing homogeneous cell-based assays. Cell Notes 10, 2–5.

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