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应用荧光探针法(Fluo-3、Fluo-4)检测钙离子浓度

阅 14528次 / 原平皓生物

简介:

    钙离子(Ga 2+ )是细胞内重要的信息传递物质。细胞内钙不仅作为一种重要的第二信使广泛参与细胞的运动、分泌、代谢和分化等多种细胞功能活动的调节,而且胞内钙离子浓度的变化与调控对于参与维持存在于细胞质膜或细胞器膜两侧的跨膜梯差,以及介导细胞对外界刺激的应答反应具有重要的调节作用。对于静息和受刺激时胞内钙离子浓度的准确了解,是确定钙离子在刺激一反应耦联中作用的要素。因此,实时测定胞内钙离子浓度的动态变化,具有重要的意义。
        目前常用的Ga2+检测方法为荧光探针法,如Fluo-3、Fluo-4等荧光探针。Fluo-3、Fluo-4其本身并无荧光活性,当与Ga2+结合后可以产生荧光,因此可用于检测Ga2+浓度。因为Fluo-3、Fluo-4无法穿透细胞膜,因此试验中一般使用其AM酯,Fluo-3 AM或Fluo-4 AM穿过细胞膜后,被细胞内酯酶剪切生成Fluo-3、Fluo-4,然后与Ga2+结合。

原理:

检测方法:

参考文献:

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