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应用发光细菌检测水质毒性与环境毒性

阅 5021次 / 原平皓生物

简介:

        发光细菌是一类在正常的生理条件下能够发射可见光的细菌。发光细菌在正常的生理条件下能发出波长在450~490nm 的蓝绿色可见光,在一定的试验条件下发光强度是恒定的。与外来受试物接触后,由于毒物具有抑制发光的作用,发光细菌的发光强度即有所改变,变化的程度与受试物的浓度在一定范围内呈相关关系,同时与该物质的毒性大小有关。
        利用发光细菌来检测有毒物质,由于有毒物质仅干扰发光细菌的发光系统,发光强度的变化可以用发光光度计测出,费时较少且灵敏度高,操作简便,结果准确,所以利用发光细菌的发光强度作为指标来监测有毒物质,在国内外越来越受到重视,在环境监测中的应用也越来越广泛。我国于1995年将这一方法列为环境毒性检测的标准方法(GB/T15441—1995)。
        目前国内常用的3种发光细菌为:明亮发光杆菌、费氏弧菌、青海弧菌。其中明亮发光杆菌在“GB/T15441-1995 水质 急性毒性的测定 发光细菌法”中所使用;费氏弧菌在欧盟的标准中所使用;青海弧菌是在青海湖的鱼体内提取的菌种,属淡水菌,在测试饮用水时有较大优势。

原理:

检测方法:

以明亮发光杆菌T3小变种检测为例:

1. 试剂与材料准备
发光细菌冻干粉复苏:使用3%的氯化钠复苏发光细菌冻干粉,然后稀释到1万细胞/ml,形成工作液
参比毒物氯化汞:制作不同浓度的氯化汞作为参比毒物0.02 - 0.24mg/L
样品:采集或准备相应的待测样品,使用蒸馏水稀释,然后加入氯化钠(终浓度3%)

2. 仪器
单管或微孔板发光检测仪

3. 样品检测
取一定量的发光细菌工作液,放入发光检测仪中检测发光值;加入待测样品,混匀,孵育15分钟;孵育完成后,检测残留发光值。

参考文献:

  1. China SEPA. 1995. GB/T15441—1995. Technology Supervision Bureau,The People’s Republic of China national standards, Water qu ality-Determination of the acute toxicity —Luminescent bacteria test[S].China SEPA (in Chinese)
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