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应用4mug进行GUS报告基因检测

阅12552次 / 原平皓生物

简介:

        Gus基因存在于E.coli等一些细菌基因组内,编码β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase,GUS)。β-葡萄糖苷酸酶是一个水解酶,能够水解β-葡萄糖醛酸苷的带有光学活性基因的衍生物,以4-甲基伞形酮-D-葡萄糖醛酸苷(4-methyklumbelliferone-D-glucuronide,4-MUG)为底物,产生的4-甲基伞形酮(4-methylumbelliferone,4-MUB)具有荧光,其检测灵敏度达fmol级。由于绝大多数植物没有检测到葡萄糖苷酸酶的背景活性,因此这个基因被广泛应用于植物基因调控的研究中。
       
         GUS基因作为报告基因的优势:
  1.  GUS蛋白在植物细胞中稳定存在,对较高的温度和去污剂有一定的耐受性;
  2.  检测方法简单,可定性或定量:使用X-Gal为底物,通过显色反应来观察;使用4-MU为底物,反应以后生成荧光物质,通过相应的荧光检测仪来进行经确定量;
  3.  多数植物组织中GUS背景表达低,样品表达能够很好区分。

原理:

检测方法:


详见相关下载文献

参考文献:

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